技术服务

高效液相色谱法：以气相色谱为基础，在经典液相色谱实验和技术基础上建立的一种液相色谱法。

HPLC与经典LC区别：固定相差别，输液设备和检测手段。1.LC：仅作为一种分离手段；①柱内径1~3cm，固定相粒径>100μm且不均匀；②常压输送流动相；③柱效低（H↑，n↓）；④分析周期长；⑤无法在线检测；2.HPLC：分离和分析；①柱内径2~6mm，固定相粒径<10μm（球形，匀浆装柱）；②高压输送流动相；③柱效高（H↓，n↑）；④分析时间大大缩短；⑤可以在线检测；

HPLC与GC差别：相同：兼具分离和分析功能，均可以在线检测；主要差别：分析对象的差别和流动相的差别；1.分析对象：GC：①能气化、热稳定性好、且沸点较低的样品；②高沸点、挥发性差、热稳定性差、离子型及高聚物的样品不可检测，占有机物的20%；HPLC：①溶解后能制成溶液的样品；②不受样品挥发性和热稳定性的限制；③分子量大、难气化、热稳定性差及高分子；④和离子型样品均可检测；⑤用途广泛，占有机物的80%；2.流动相差别：GC：①流动相为惰性气体；②组分与流动相无亲合作用力，只与固定相作用；HPLC：①流动相为液体；②流动相与组分间有亲合作用力，为提高柱的选择性、改善分离度增加了因素，对分离起很大作用；③流动相种类较多，选择余地广；④流动相极性和pH值的选择也对分离起到重要作用；⑤选用不同比例的两种或两种以上液体作为流动相；⑥可以增大分离选择性；3.操作条件差别：GC：加温操作；HPLC：①室温；②高压；（粘度大，峰展宽小）

HPLC法中分离条件的选择：1.固定相与装柱方法的选择：选粒径小的、分布均匀的球形固定相（dp≤10μm）；首选化学键合相，匀浆法装柱；2.流动相及其流速的选择：选粘度小、低流速的流动相—甲醇，1mL/min；3.柱温的选择：选室温25℃左右；

---本文摘自《实验与分析》