发布时间:1/25/2016 3:41:00 PM

流动相是色谱分析中不可缺少的,它可以是气体、液体、也可以超临界流体等。常见的流动相主要有:乙腈-水溶液、乙腈-醋酸水溶液、甲醇-水溶液、乙腈-磷酸水溶液等。关于流动相的选择,这里总结下,流动相的储存秘诀,以及试剂混合会导致的一些色谱故障,再以及流动相长霉时应该如果处理的问题!

流动相的配制要点要记得:1.配制不含水的有机溶剂类流动相所用量筒应区分开,必须是干燥的,不得有水。2.流动相的抽滤。含水流动相和不含水流动相的抽滤装置应区分开。抽滤不含水的有机溶剂类流动相所用装置必须是干燥的,不得有水。3.超声波震荡,除气泡。4.使用0.04%的叠氮钠溶液以防止流动相长菌。

流动相的储存及标识:将适量抽滤好的流动相倒入流动相专用储液瓶,润洗一次后倒入废液瓶,再将剩余流动相全部倒入专用储液瓶;填写《流动相标签》,并将标签贴在储液瓶上。更换流动相时应及时更新《流动相标签》。流动相效期

不可忽略的步骤:1.加盐流动相做完实验冲洗步骤:先用50%纯水和50%有机相冲洗,然后逐渐将有机相将低到10%甚至5%,最后用100%有机相冲洗封柱,整个过程1h以上。若是冲洗一晚上,则用5%甲醇以0.1ml/min以下的低流速冲洗。2.10%异丙醇在线冲洗密封垫:10%异丙醇需定期更换,流动相不加盐时,周期可以设置1min,冲洗0.2min;流动相加盐时,周期设置1min,冲洗0.5min,最大为0.7min(长期处于最大值会导致蠕动泵磨损)。3. 流动相更换:流动相瓶必须清洗干净,含水流动相需定期更换避免长菌,纯水2天换一次,进样前和实验过程中需不定时观察流动相有无沉淀。4. 流动相瓶清洗:先用酸液浸泡,然后用大量的自来水冲洗,接着用蒸馏水涮3次以上,最后一次用哇哈哈水润洗。

关于流动相所用试剂:

溶剂中的杂质会导致出现“鬼峰”,特别是梯度解吸时。

溶剂混合产生的问题:

样品的溶解:

流动相过滤头产生的问题

缓冲液的使用:使用前必须过滤; 使用后一定要进行清洗 ,以免造成腐蚀、磨损、阻塞:用纯水冲洗30-60min(1ml/min),再用甲醇冲洗30min; 易受到细菌和霉菌的影响。注意:不能直接用有机溶剂冲洗。

流动相脱气的必要性:

更换流动相时的注意事项:更换互溶流动相时注意清洗吸滤头;更换不互溶流动相时必须用中间过渡液清洗系统,例如异丙醇;更换缓冲液时,应用纯水过渡;更换流动相后应使用PURGE键快速排液。排去残液或气泡。

注意缓冲液的pH值与使用的色谱柱匹配:缓冲液必须过滤膜;使用缓冲液期间,用注射器推纯水,清洗柱塞杆,延长泵密封垫寿命;分析完后用纯水清洗系统。

自动进样器清洗液:如选择不当重现性不好;常用1:1的甲醇水或不含盐的流动相;清洗液必须过滤,经常更换;清洗液需对样品有一定的溶解度;不可用乙腈作为自动进样器的清洗液。

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